نیکول بایر کار خود را در کمدی استندآپ آغاز کرد و به سرعت در این زمینه پیشرفت کرد.  بایر در چندین برنامه تلویزیونی و فیلم کمدی از جمله "Late Night with Seth Meyers" (شب دیروقت با سث مایرز)، "This Is Us" (این ما هستیم) و "Transparent" (شفاف)  حضور داشته است.
او همچنین به عنوان صداپیشه در انیمیشن‌هایی مانند "Tuca & Bertie" (توکا و برتی) و "Amphibia" (آمفیبیا) نیز فعالیت داشته است.